Пцр на коклюш инвитро

Как проводится лабораторная диагностика (анализы) коклюша и паракоклюша?

Характерные приступы судорожного кашля с протяжными выдохами не всегда присутствуют у детей, получивших прививки, например, АКДС. Поэтому врачи и родители рассчитывают, что анализ на коклюш расставит все точки над «и». Заразная болезнь особенно тяжело протекает у детей первого года жизни. Инкубационный период составляет в среднем 1–2 недели, начальные симптомы напоминают ОРВИ.

Биологические особенности бактерий, вызывающих коклюш и паракоклюш

Род Bordetella объединяет 9 видов бактерий, из которых сильными патогенными свойствами обладают B. pertussis и B. parapertussis — соответственно возбудитель коклюша и паракоклюша (коклюшеподобной инфекции). Это грамотрицательные, аэробные коккобациллы. Патогенные свойства B. pertussis связаны с выделением коклюшного токсина белковой природы. Токсичные вещества бактерий в инактивированной форме включают в состав коклюшных вакцин.

Оптимальная температура выращивания культуры бордетеллы при бактериологическом посеве составляет 35°C. Возбудитель коклюша размножается на специальной среде картофельно-глицеринового либо казеиново-угольного агара. Через несколько дней возникают колонии, имеющие выпуклую форму, с серебристой поверхностью. По мере хранения выделенных штаммов проявляется изменчивость, прежде всего, меняются иммуногенные свойства возбудителя.

В каких случаях назначают лабораторные исследования

Перед тем, как сдавать анализ на коклюш, необходимо учесть, что симптомы интоксикации не проявляются сразу же после заражения. Затем усиливается ночью и по утрам приступообразный кашель. Лицо больного ребенка краснеет, периодически возникают характерные для коклюша вдохи. Завершается такой приступ отхождением вязкой мокроты либо рвотой.

Периодичность течения заболевания

Лабораторный посев и ПЦР-исследование обычно назначают в предсудорожном периоде, когда еще нет специфических вдохов при кашле. Учитываются при этом такие диагностические признаки коклюша, как непосредственные контакты с больным человеком в детском саду, школе или семье. Врач, направляя ребенка на бактериологический посев и ПЦР, также смотрит на результаты общего анализа крови.

Лабораторная диагностика коклюшной инфекции у детей

Врачи выбирают алгоритм исследования в зависимости от возраста маленького пациента, длительности проявления симптомов заболевания, вакцинального статуса. Основной метод лабораторной диагностики — бактериологический анализ на коклюш и паракоклюш. Флюорографию назначают для исключения заболевания с похожими симптомами (острый бронхит, воспаление легких, плеврит).

Специалист в первую очередь обращает внимание на клиническую картину при осмотре ребенка, опрашивает родителей. Врач назначает исследования, способные подтвердить диагноз, при отсутствии явных симптомов заболевания. Ценный материал для педиатра дает результат анализа на коклюш в «Инвитро» (диагностическом центре). Высокий уровень лабораторной диагностики позволят определить степень тяжести заболевания, выявить осложнения инфекции.

Какие анализы сдавать для диагностики возбудителя коклюша и паракоклюшной инфекции

  1. Мазок из глотки — позволяет выделить культуру бактерий с помощью микробиологического посева.
  2. Иммуноферментный анализ крови — метод ИФА для определения антигенов и антител.
  3. Полимеразная цепная реакция — тест ПЦР для выделения ДНК возбудителя.

Примерная схема лабораторной диагностики коклюша и паракоклюша

Получение результата бактериального посева занимает несколько дней. Между тем, экспресс-тест ПЦР дает возможность расшифровать диагноз спустя всего несколько часов. Информативность вышеперечисленных методов диагностики выше у невакцинированных детей. После четырех недель прямые тесты уже не столь эффективны для выделения и определения возбудителя коклюша. Серология позволяет уточнить картину в поздние периоды заболевания даже у ранее вакцинированных детей.

Бактериологическое исследование

Медперсонал берет мазок у детей с задней стенки глотки, далее высевает на питательную смесь в специальных лабораторных емкостях, где происходит развитие микробов в течение нескольких дней. Готовый материал тщательно изучается под микроскопом, чтобы выделить колонии B. pertussis или B. parapertussis. Бактериологическое исследование рассчитано на то, что в начале заболевания бактерии находятся в глотке и носовой полости.

Микробиологический посев с последующим микроскопическим исследованием при коклюше позволяет диагностировать либо исключить инфекцию. Если результаты анализа положительные, то необходимо начать адекватное лечение и профилактику осложнений. Однако бактериологическое исследование малодостоверно на фоне терапии антибактериальными средствами.

Забор материала тампоном из глотки доставляет незначительный дискомфорт взрослому, но малыши обычно сопротивляются и капризничают. Для такого случая предусмотрен вариант забора слизи для исследования из носа. Перед тем, как сдать анализ, рекомендуется не полоскать горло, не чистить зубы, не закапывать лекарства в нос. Необходимо, чтобы в глотке и в носовой полости накопилась мокрота с возбудителем заболевания.

ПЦР и серология при коклюше

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — исследование бактериальной ДНК. Метод ПЦР позволяет диагностировать коклюш на молекулярно-генетическом уровне. Биологический материал получают при заборе мокроты больного коклюшем. Метод полимеразной цепной реакции часто используют при отрицательных результатах бактериологического исследования.

Лабораторный иммуноферментный анализ подходит для периода заболевания, когда в организме уже вырабатываются антитела. Методика ИФА основывается на качественном определении антигенов и специфических антител в кровяной плазме. Наличие иммуноглобулинов М характерно для самого заболевания, а иммуноглобулины G циркулируют в крови уже после перенесенной инфекции.

Серологический тест может назначаться для ретроспективной диагностики коклюша, выявления очага инфекции и предупреждения ее распространения. Расшифровка результата покажет в крови больных и переболевших детей повышение уровней специфических иммуноглобулинов М и G к токсинам бактерий Bordetella.

Общий анализ крови при коклюше указывает на наличие либо отсутствие воспалительного процесса в организме ребенка. Заболевание коклюшем можно заподозрить при повышенном количестве лимфоцитов и лейкоцитов, при этом показатели СОЭ будут в норме. Врачи рекомендуют сдавать кровь на анализ в утренние часы, перед завтраком.

Лечение коклюша в РФ включено в программу ОМС, в государственных медучреждениях проводят все необходимые мероприятия. Альтернативная возможность обследования — обращение в диагностические центры «Инвитро». Врач-консультант лаборатории объяснит назначение каждого анализа, даст его подробную расшифровку.

Коклюш – острая антропонозная инфекционная болезнь с воздушно-капельным механизмом передачи возбудителя, вызываемая коклюшным микробом и характеризующаяся длительным своеобразным спазматическим кашлем с поражением дыхательной, сердечно-сосудистой и нервной систем. Возбудитель коклюша – Bordetella pertussis – грамотрицательная коккобацилла, относится к роду Bordetella. Помимо B. pertussis респираторные инфекции у людей могут вызывать B.parapertussis и B.bronchiseptica.

B.parapertussis вызывает паракоклюш – заболевание, подобное коклюшу, но с более легким течением. Перекрестный иммунитет в отношении коклюша и паракоклюша отсутствует. B.bronchiseptica вызывает бронхисептикоз (бордетеллез), протекающий как ОРВИ, возникающий при контакте с инфицированным животным, у людей с ослабленной иммунной системой может вызывать пневмонию. Выделяют типичные (кашель имеет приступообразный характер) и атипичные (отсутствует спастический кашель) формы коклюша. В течении типичных форм коклюша различают 4 периода: инкубационный (в среднем 14 дней), катаральный (1–2 недели), период спазматического кашля (4–6 недель) и период разрешения. Выраженность клинических проявлений зависит от тяжести заболевания, оцениваемой по: длительности катарального периода, частоте приступов кашля, наличию цианоза лица при кашле, гипоксии вне приступов кашля, степени нарушения работы сердечно-сосудистой системы, наличию и степени выраженности энцефалических расстройств. Диагноз коклюша считается подтвержденным, если имеется соответствие клиническому стандартному определению случая коклюша, лабораторное подтверждение и/или имеется эпидемиологическая связь с лабораторно подтвержденным случаем. Возможно сочетанное инфицирование с другими возбудителями ОРЗ, что отягощает течение болезни.

Читать еще:  Риниты классификация

Показания к обследованию. Диагностика: больные с подозрением на коклюш и паракоклюш (в соответствии со стандартным определением случая*), а также длительно (5–7 дней и более) кашляющих, независимо от указаний на контакт с больными.

По эпидемическим показаниям: дети и взрослые в детских учреждениях, родильных отделениях и детских больницах, в которых были выявлены больные коклюшем.

  • Острые бронхиты, вызванные Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, вирусными возбудителями респираторных инфекций;
  • аспирация инородного тела;
  • муковисцидоз;
  • лимфогранулематоз.

Материал для исследований

  • Заднеглоточный мазок – культуральное исследование;
  • носоглоточный мазок – культуральное исследование;
  • мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов;
  • гортанно-глоточные смывы – обнаружение АГ;
  • сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение чистой культуры бордетелл и определение их видовой принадлежности; выявление ДНК B.pertussis, B.parapertussis, B.Bronchiseptica методом ПЦР, выявление АГ B. pertussis в гортанно-глоточных смывах с использованием РНИФ; обнаружение специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. При выявлении бордетелл выполняют выделение чистой культуры микроорганизмов и определение их видовой принадлежности методами микроскопии, постановкой РА с видоспецифическими сыворотками, проведением биохимических тестов и оценкой подвижности микроба. Культуральный метод характеризуются большой продолжительностью исследования, его диагностическая чувствительность не превышает 10–20%; аналитические характеристики во многом зависят от качества используемых сред (добавление крови животных является обязательным условием) и реагентов для иммунологических и биохимических идентификационных тестов.

Обнаружение ДНК методом ПЦР наиболее эффективно и востребовано для ранней диагностики, наибольшими диагностическими возможностями обладают методики, позволяющие обнаруживать и дифференцировать значимые для человека виды Bordetella с чувствительностью 5 x 10 2 – 1 x 10 3 ГЭ/мл исследуемого материала со специфичностью 100%.

Выявление АТ позволяет диагностировать коклюш на поздних сроках. Обнаружение специфических АТ проводят с использованием: РА для диагностики коклюша и паракоклюша, ИФА для обнаружения АТ (Ig M, A, G) к различным антигенам B.pertussis и B.parapertussis. Выявление специфических IgА методом РНИФ практически не используется по причине отсутствия стандартизации; чувствительность анализа, по данным авторов метода, варьирует в широком диапазоне от 10 3 до 10 5 микробных клеток в 1 мл, при этом положительные результаты исследования можно учитывать только при наличии типичной симптоматики коклюша.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Культуральное исследование с диагностической целью следует проводить в ранние сроки заболевания (1–2 недели болезни); в более поздние сроки высеваемость возбудителя резко снижается. Оптимальное время для обнаружения ДНК методом ПЦР – до 3-х недель от начала заболевания. Определение АТ целесообразно с 3-й по 6-ю недели от начала заболевания, далее титры АТ начинают снижаться. У детей до 6 лет, вакцинированных против коклюша, можно использовать только пробы крови, взятые в динамике (парные сыворотки), причем первый раз кровь берется не ранее чем через 3 недели от начала заболевания, повторно – спустя 2 недели.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Диагноз коклюша считается лабораторно подтвержденным в случае выделения культуры B.pertussis; обнаружения специфического фрагмента генома B.pertussis методом ПЦР; выраженной сероконверсии (увеличение в 4 и более раз уровня специфических IgG и/или IgA в парных сыворотках, или обнаружении у не привитого пациента специфических IgM). Диагностическим титром реакции агглютинации у не привитых и не болевших детей считают разведение 1:80. Необходимо учитывать, что у детей в возрасте до 3 месяцев могут присутствовать материнские АТ, но, как правило, в низких титрах. Диагноз коклюш, вызванный B.parapertussis, ставится в случае выделения культуры B.parapertussis или обнаружения специфического фрагмента генома B.parapertussis методом ПЦР, или при обнаружении АТ методом РА в титре не менее 1:80. Заболевание, вызванное B.bronchiseptica, диагностируется при выделении культуры или обнаружения специфического фрагмента генома методом ПЦР.

* Стандартное определение случая заболевания коклюшем – острое заболевание, характеризующееся: сухим кашлем с постепенным его усилением и приобретением характера приступообразного спазматического на 2-3 неделе заболевания, особенно в ночное время суток или после физической и эмоциональной нагрузки; явлениями апноэ, гиперемией лица, цианозом, слезотечением, рвотой, лейко- и лимфоцитозом в периферической крови, развитием «коклюшного легкого», жестким дыханием, отделением вязкой мокроты; незначительным повышением температуры.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Copyright ФБУН Центральный НИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 1998 — 2020

Центральный офис: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д.3а, метро «Шоссе Энтузиастов», «Перово»
+7 (495) 788-000-1, info@cmd-online.ru

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Читать еще:  Профилактика хронического тонзиллита у детей

Что включает в себя анализ на коклюш, как и где его проводить?

Бывает так, что человека одолевает кашель, который не могут вылечить даже сильнодействующие препараты, а походы к врачу не дают особого результата, потому что диагноз постоянно меняется. В этом случае стоит задуматься о том, что кашель – это не самостоятельная проблема, а только симптом коклюша.

Это заболевание редко, но всё же встречается и в наши дни, несмотря на повсеместную вакцинацию. Какие анализы нужно сдавать, чтобы подтвердить этот неприятный диагноз, вы узнаете дальше.

Что это за болезнь и чем опасна?

Коклюшем называют острое инфекционное заболевание, главным симптомом которого является длительный кашель, беспокоящий больного частыми приступами. Заболевание провоцируется бактериями Bordetella pertussis.

Вредоносные микроорганизмы попадают в окружающую среду при кашле и чихании больного в период острой фазы заболевания (около 20 первых дней). Поэтому коклюшем легко заразиться при контакте с больным, так как он передаётся воздушно-капельным путём.

Процесс болезни можно разделить на четыре этапа:

  1. Инкубационный. Длительность от 10 до 14 суток с момента заражения. Этого времени достаточно, чтобы вредоносные микроорганизмы проявили свои патогенные свойства.
  2. Продромальный (по-другому катаральный). Длительность от 3 до 14 дней. В этот период у ребенка или взрослого происходят изменения в крови и проявляются первые показатели заболевания (кашель, повышенная температура), которые очень похожи на признаки обычной простуды, поэтому редко вызывают подозрения.
  3. Спазматический. Длительность от 4 до 6 недель. В этот период больной страдает от приступов специфического коклюшного кашля.
  4. Этап восстановления и окончательного выздоровления.

Заболеть коклюшем можно в любом возрасте. В группе риска оказываются люди, у которых ослаблен иммунитет после вакцинации. Труднее всего переносят заболевание маленькие дети, которые часто страдают от осложнений, влияющих на нервную и дыхательную систему, а также на кровообращение.

Проблема в том, что на втором этапе диагностировать коклюш практически невозможно (чаще всего это происходит только в спазматическом этапе). Но для начала специфической антибактериальной терапии, которая помогает остановить прогрессирование инфекции, будет уже поздно.

Хуже всего приходится детям, заболевшим коклюшем до 1 года, если им не успели сделать прививки против этого заболевания. В этом случае течение болезни будет очень тяжелым. Это может привести к осложнениям с нервной, сердечно-сосудистой и дыхательной системой у ребёнка, которые нередко приводят к лечению в условиях реанимации.

У детей старше года, не прошедших вакцинацию, также есть риск тяжелых последствий заболевания, но он гораздо ниже. В этих случаях коклюш может перерасти в пневмонию, ателектаз легкого или энцефалопатию.

Всех серьёзных последствий для детей, заболевших коклюшем, можно избежать, если относиться к кашлю более серьёзно и проводить своевременную диагностику. Такие меры особенно требуются детям, которые не успели пройти вакцинацию.

Если ребёнок, подросток или взрослый получили правильную вакцинацию, то у них коклюш чаще всего не развивается, или проявляется в виде заболевания с незначительными симптомами.

Тем не менее, привитый больной, страдающий от лёгкой формы коклюша, может быть опасен для окружающих. Такой больной представляет не меньшую опасность, чем человек с ярко выраженными симптомами коклюша, так как оба они могут заразить окружающих при кашле и чихании.

Коклюш может привести к следующим осложнениям:

  • Бронхит.
  • Пневмония.
  • Энцефалопатия.
  • Спадение долей легких.
  • Разрывы барабанных перепонок.
  • Недостаточность органов дыхательной системы.
  • Кровоизлияния в сетчатку глаз или головной мозг.

В каких случаях нужно обследоваться?

Обследование на коклюш следует проводить в этих случаях:

  1. Если ребёнок кашляет более 5-7 дней подряд (тем более, если кашель проявляется приступами).
  2. Если человек тесно контактировал с заболевшим коклюшем.
  3. Если у взрослого есть подозрение на коклюш. Это особенно важно для тех, кто живёт в одном доме с грудными младенцами и маленькими не привитыми детьми.
  4. Особенно важно проводить диагностику для людей, работающих в детских учреждениях.

По этой причине, именно родители, родственники и воспитатели часто становятся причиной, по которой ребёнок заболевает коклюшем.

Всегда есть риск, что человек заболел не коклюшем, а паракоклюшем – инфекционным заболеванием, поражающим не только дыхательные пути и кровь, но и ЦНС. Этот недуг имеет симптомы, схожие с коклюшем, только менее выраженные. Чаще всего развивается у детей. В этом случае также необходимо провести анализ, чтобы установить точный диагноз.

Лабораторная диагностика

Чтобы выявить коклюш, назначают следующие анализы:

  • Общий анализ крови.
  • Общий анализ мочи.
  • Анализ мокроты.
  • Бактериологический посев.
  • Методика ПЦР.
  • Иммунологическое исследование.
  • Методика латекс микроагглютенации.

Если есть подозрении на инфекционную природу заболевания при кашле, и кроме этого симптома также есть повышенная температура и слабость, анализ крови и его расшифровка просто необходимы.

Он может дать точную информацию о том, идёт ли воспалительный процесс в организме. Но о причине этого процесса анализ крове рассказать не может, поэтому он проводится только вместе с другими анализами, которые могут показать общую клиническую картину состояния больного. Не забывайте, что анализ крови всегда сдаётся натощак.

Биоматериал для анализа (моча) собирается утром, обязательно в чистую емкость, лучше всего, если она будет куплена в аптеке. Отнести мочу в лабораторию нужно как можно быстрей (не позже 2 часов после сбора), тогда эффективность анализа будет выше.

Такой анализ позволяет отличить коклюш от других заболеваний, таких как грипп, туберкулёз и бронхиальная астма. Так же, как и при анализе мочи, в лаборатории изучаются цвет, прозрачность и кислотность мокроты. Кроме этого, обращается внимание на наличие кровянистых прожилок. При коклюше выделяемая мокрота должна быть похожа на слизь. Если эта характеристика меняется, значит присоединилось какое-то другое заболевание.

Собирают мокроту, как правило, утром, так как её активная выработка происходит в ночные часы. Перед этим больной не должен чистить зубы, есть и принимать лекарства. Необходимо только прополаскивает ротовую полость.

Бактериологический посев

Сбор материала для проведения анализа делает медицинский работник, захватывая частички материала с поверхности задней стенки глотки больного специальным тампоном. Такой забор необходимо проводить на 5-7 день болезни, до начала терапии антибиотиками, в противном случае результаты исследования могут оказаться ложными.

Читать еще:  Сколько должен работать увлажнитель воздуха в комнате

Перед сдачей анализа, пациент не должен чистить зубы, есть и пить, а также полоскать горло. Если этого не удалось избежать, сдавать анализ можно будет не раньше, чем через 2-3 часа.

Методика ПЦР

Этот метод диагностики коклюша является самым лучшим, так как ложноотрицательные результаты встречаются редко, а эффективность зафиксирована в 80%с случаев. Проводится ЦПР в первые 3-4 недели от начала заболевания, когда в слизистой дыхательных путей ещё присутствует возбудитель — Bordetella pertussis. Материал для этого исследования получают, взяв соскоб с задней стенки глотки. Расшифровка занимает 1–2 дня.

Перед проведением анализа не разрешается чистить зубы, есть и пить около 2-3 часов. Незадолго до сбора материала можно прополоскать горло тёплой кипяченой водой.

Как проходит иммунологическое исследование?

Материалом, для проведения этого исследования, служит анализ крови и выделений из носа, которые проверяют на наличие антител к коклюшу, а именно иммуноглобулин М (Ig M), который находится быть в крови, а в слизи из носа должен быть иммуноглобулин А (IgA).

На разных этапах болезни проводятся определенные виды анализов на такие антитела. Их можно выявить только с 3 недели после начала заболевания. В повышенных концентрациях они сохраняются ещё в течение 3-4 месяцев.

Методика латекс микроагглютенации

Это экспресс-метод лабораторной диагностики, результаты которого можно получить уже через 30–40 минут после забора материала. Это исследование позволяет выявить антигены возбудителя коклюша, в том случае, если они уже выработались. В этой методики применяются антигены возбудителя на стадии распада, что изредка может приводить к ложноположительным результатам.

Где сдавать взрослым и детям и какова цена?

Анализы на коклшюш можно сдавать как в городской больнице, так и в частной лаборатории. Частная организация не проводит анализ быстрее, но попасть туда можно без очереди. За такое удобство придётся заплатить определённую сумму денег. В таблице ниже вы можете выбрать подходящую для вас по цене лабораторию, чтобы сдать все необходимые анализы на коклюш и паракоклюш:

Анализ крови на коклюш

гинеколог / Стаж: 21 год

Дата публикации: 2019-07-05

уролог / Стаж: 27 лет

Коклюш относится к заболеваниям, вызываемым бактериальной флорой. Возбудителем коклюша является один из видов коккобациллы. Симптомы коклюша сходны с теми, что наблюдаются при гриппе, кори, бронхоадените, ОРВИ, туберкулезе. Все эти патологии сопровождаются сильным кашлем, который характерен и для коклюша.

Для дифференциации одного заболевания от другого проводят ряд обследований, в том числе и исследование крови. При общем анализе крови определяют наличие лейкоцитоза, который при наличии возбудителя в организме значительно возрастает. Остальные показатели в этом случае остаются неизменными, исключением является лишь скорость оседания эритроцитов, которая может заметно снизиться, но лишь на катаральной стадии заболевания.

Серологическое исследование крови позволяет определить наличие антител к возбудителю или наличие участков ДНК бактерии коклюша.

Показания к анализу

Анализ проводится при необходимости установить точный диагноз. У взрослых с подозрением на коклюш такая диагностика необходима, так как эту патологию часто принимают за затянувшееся течение ОРЗ.

Исследование назначают при наличии следующих симптомов:

  • Высокой температуры;
  • Сильного атипичного кашля, нарушающего дыхание;
  • После окончания приступа кашля выделяется стекловидная мокрота или начинается рвота;
  • Проблемы со сном на фоне частых кашлевых приступов.

В обязательном порядке диагностика проводится всем лицам, находившимся в непосредственном контакте с заболевшим.

Правила подготовки к исследованию

Подготовка к анализу на коклюш заключается в соблюдении следующих правил:

  • Забор материала для анализа проводится строго натощак;
  • Последний прием пищи должен состояться за 8—12 часов до посещения лаборатории;
  • Накануне и в день исследования рекомендуется избегать повышенных физических нагрузок;
  • В течение суток, предшествующих анализу, и непосредственно перед анализом, нельзя принимать алкоголь и курить.

Перед

проведением тестов необходимо прекратить прием всех лекарственных препаратов, особенно противомикробных, которые могут исказить истинную картину заболевания. Если отменить лекарства нельзя, об их приеме следует сообщить лаборанту и лечащему врачу.

Причины ложных результатов

Результат обследования будет ложноположительным, если проводиться сразу после выздоровления пациента. В этом случае в материале будут присутствовать антигены к возбудителю. У сильно ослабленных пациентов с низким уровнем иммунитета антитела в крови будут обнаруживаться в течение длительного времени.

Положительный результат будет при нахождении в организме родственных бактерий, вызывающих коклюш микроорганизмов. В такой ситуации проводят ПЦР для уточнения.

Незначительное наличие антител в сыворотке является не только свидетельством начала заболевания, а может быть признаком уже сформированного иммунитета к заболеванию. Ложноположительный анализ крови будет получен после проведения вакцинации, в этом случае человек является носителем патогена.

Как проводится анализ

Для проведения качественного анализа необходимо до десяти миллилитров венозной крови, забор которой осуществляется из локтевой вены.

Для выявления возбудителя форменные элементы отделяют от сыворотки. После этого проводится поиск антител в плазме, которые появляются через две недели после попадания бактерии в организм. Минусом данного метода является отсутствие методики, выявляющей именно бактерии коклюша, а не родственные с ними организмы. Наличие антител обнаруживается после окрашивания.

Метод диагностики, в основе которого лежит реакция нейтрализации, является более трудоемким. В это случае возможен количественный подсчет имеющихся антител, даже при минимальной их концентрации. Данный способ выявления заболевания используется редко из—за сложности проведения.

Иммуноферментный анализ. Для его проведения используются как сами бактерии, так и компоненты их клеток, а также специальные бактериальные комплексы. Но и в этом случае существует риск возникновения реакции с другими грамотрицательными бактериями.

При этом способе диагностике в раствор, уже содержащий бактерии, добавляется сыворотка. Далее добавляются флуоресцеин—содержащие ферменты, которые оседают на соединение антигена и антитела, данный метод можно использовать только на четвертой неделе с момента заражения. До этого срока проведении исследования подобным способом не имеет смысла.

ПЦР — самая точная методика определения наличия бактерии коклюша в организме. При наличии участков ДНК, диагноз коклюш считается установленным. Поэтому его часто используют совместно с иммуноферментным анализом крови.

Нормы и расшифровка результата

Диагноз коклюш устанавливается, если титр антител оказывается равным или более чем 1:80. Отрицательное значение не является свидетельством наличия заболевания. В этом случае анализ через две недели проводят повторно, и лишь после второго отрицательного результата говорят об отсутствии инфекции.

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector